大腸菌群是多管定生大肠定度的评定工用來評價食品衛生狀況的指標。為了確保檢驗結果可信，发酵法测試將測量不確定度的活饮評定結果引入到生活飲用水中總大腸菌群測定能力驗證考核工作中。
不確定度評定是用水表示被測量值的分散性與測量結果相關性的參數，是中总判斷測量結果質量的重要依據，也是菌群反映檢驗過程中各因素對檢驗結果不確定度的影響程度，任何檢驗（測）結果都不可避免因誤差而導致測定值的不确不確定度，國際標準ISOdEC17025中明確規定檢測報告必須有檢測結果不確定度數據及說明，多管定生大肠定度的评定工尤其檢測結果處於臨界值時，发酵法测必須出具包含不確定度的活饮檢測報告。通過對檢測數據不確定度評估，用水可以分析出檢測過程中哪些因素是中总重點關注的問題，以便提高檢測能力，菌群保證數據準確。不确
本文分析多管發酵法測定生活飲用水中總大腸菌群過程中引入不確定度的多管定生大肠定度的评定工來源，比較各分量不確定度所占的比例，計算生活飲用水中總大腸菌群測定結果合成不確定度和擴散不確定度，從而定量描述生活飲用水中總大腸菌群測定結果的不確定度。為類似大腸菌群測定結果不確定度的評定提供參考。
一、材料與方法
1、試驗材料
生活飲用水：吉林省質量技術監督局提供，螺旋管裝凍幹粉，用加冰袋的密封盒取回實驗室。
2、儀器與試劑
SW-CJ無菌操作台：中國蘇州安泰空氣技術有限公司；PRESOCLAVE-Ⅱ高壓滅菌器：西班牙SELECTA；DHP-9162恒溫培養箱：太倉市科教器材廠；ABl35-S電子天平（±0.01g）：瑞士梅特勒-托利多公司。
3、試驗方法
從40C冰箱取出裝有凍幹粉的螺旋管，於室溫下放置15min複溫。無菌操作向螺旋管中加入10mL0.85％無菌生理鹽水溶液進行複溶，蓋好瓶蓋，室溫下靜置2min。使用均質器充分混懸螺旋管中的內容物，靜置30s以消除產生的泡沫。把菌液吸入無菌瓶中，再向螺旋管中加入10mL0.85％無菌生理鹽水衝洗螺旋管，把洗液液吸入無菌瓶中；重複上述衝洗螺旋管過程5次。總稀釋液50mL0.85％無菌生理鹽水（複溶10mL0.85％無菌生理鹽水+總稀釋液50mL0.85％無菌生理鹽水），振蕩混勻，做為原倍（100）樣品。
依據GB/T5750.12-2006《生活飲用水標準檢驗方法微生物指標（多管發酵法）》進行檢驗。
4、不確定度的主要來源
檢驗結果不確定度的主要來源見圖1。
二、各不確定度分量的評定
1、樣品製備引入的不確定度評定
能力驗證過程中，樣品製備是決定測定結果準確性的關鍵因素。本實驗樣品製備過程中主要由10mL刻度吸管分6次將樣品逐步洗出。JJG196-2006規定，10mL刻度吸管允許誤差為±0.05mL。均屬於B類評定，按矩形分布計算不確定度。因此，10mL刻度吸管引入的不確定度μ（10mL刻度吸管）為：
2、樣品稀釋引入的不確定度評定
樣品稀釋過程不確定度來源主要是10mL刻度吸管和1mL移液器。JJG196-2006規定，10mL刻度吸管允許誤差為±0．05mL。JJG646—2006移液器檢定規程規定1000μL移液器吸取1mL時允許誤差為±1.0％，均屬於B類評定，按矩形分布計算不確定度。因此，10mL刻度吸管和1nlL移液器引入的不確定度μ（10mL刻度吸管）和μ（1mL移液器）分別為：
10mL刻度吸管和1mL移液器引入的相對不確定度μ（10mL刻度吸管）和μ（1mL移液器）分別為：
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