4-己基間苯二酚(4-HR)作為一種能夠抑製褐變的高效新型抗氧化劑，能有效防止產品在儲存過程中由於多酚氧化酶的液相催化而產生氧化褐變或色澤變黑，因此在水產品保存中得到廣泛應用，色谱特別在蛋白質豐富，法测極易褐變腐敗的定鲜鮮蝦保存中發揮著不可替代的作用。我國強製性國家標準GB2760-2014中明確規定鮮水產(僅限蝦類)中4-HR最大殘留量不得超過1mg/kg。虾中但有些生產商或供應商為了達到保鮮、高效護色的液相目的而在鮮蝦中過量添加4-HR，極易造成其殘留量超過限量的色谱lmg/kg的規定。從而對人體產生一定的法测危害。目前4-HR測定還沒有統一的定鲜國家標準，僅有一個地方標準和一個行業標準。虾中主要檢測技術有氣相法、高效液相法、液相氣質法、色谱液質法，但關於4-HR測定的不確定度還尚未見報道。
測量不確定度是表征合理地賦予被測量之值的分散性，與測量結果相關聯的參數，它能對檢測數據進行客觀真實的評價，給出測量結果的可信程度。當檢測結果在限量值附近時，實驗室出具的檢測報告將直接影響到樣品合格與否的判定，因此開展測量不確定度的分析與評定對確保測量結果的準確性與可靠性具有十分重要的意義。本文依據DB33/3007-2015《食品安全地方標準食品中4-己基間苯二酚殘留量的測定》，對測量結果的不確定度進行全麵係統的評定，篩選出不確定度貢獻率較大的主要因素，在實驗中加以重視和改進，為實驗室質量控製(如產品質量臨界值時的判定)提供可靠依據，同時為檢測其他產品中4-HR殘留量的不確定度提供參考，評定方法參照JJFll35-2015《化學分析測量不確定度評定》和JJFl059.1-2012《測量不確定度評定與表示》。
一、材料和方法
1、試劑和材料
4-己基問苯二酚標準物質(純度為97％)：TRC公司；乙腈為色譜純；二氯甲烷、甲醇、丙酮和正己烷均為分析純。
2、主要儀器設備
Agilent1260Infinity高效液相色譜儀；電子天平：丹納和赫西特傳感工業有限公司；離心機：Thenno公司；旋渦混合儀：IKE公司；旋轉蒸發儀：BUCHI公司；固相萃取裝置：安譜公司；氮氣吹幹儀：Biotage公司；高速組織搗碎機：睿科公司。
3、檢測方法
（1）樣品前處理
根據DB33/3007-2015《食品中4-己基間苯二酚殘留量的測定》的要求：從原始樣品中取出代表性的樣品500g，去頭、去殼、去附肢，取可食部分。用組織搗碎機搗碎混勻，均分成兩份分別裝入到潔淨容器中作為試樣，密封並標識。將試樣放入-18℃以下保存。稱取59(精確到0.01g)樣品置於50mL離心管中，加入10mL乙腈二氯甲烷溶液(體積比：7:3)，高速組織搗碎機勻漿2min，蓋塞，旋渦混勻lmin，超聲提取10min，8500r/min離心5min，取上清液轉入100mL旋轉蒸發瓶中，重複上述操作一次。合並提取液於45℃旋發近幹，取7.5mL二氯甲烷分三次超聲溶解，合並，待淨化。將上述待淨化液轉至固相萃取柱中。用6mL正己烷淋洗，將固相萃取小柱抽至近幹，用6mL甲醇丙酮溶液(體積比：1:1)洗脫，收集洗脫液。洗脫液於50℃氮氣吹幹，殘留物用1.0mL流動相溶解，過0.22μm的有機相為空濾膜，供液相色譜測定。
（2）標準溶液的配製
標準儲備液：準確稱取0.1030g4-己基間苯二酚標準品(純度為97％)，用乙腈水溶液(體積比：6:4)溶解並定容至100mL，濃度為1mg/mL。
（3）色譜條件
色譜柱：C18(5μm，4.6×250mm)；柱溫：35℃；流動相：乙腈-水(6+4)；流速：1.0mL/min；進樣量：10μL；熒光檢測器：激發波長：280nm，發射波長：310nm。
（4）數學模型
X：試樣中4-己基間苯二酚的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；
C：試樣溶液中4-己基間苯二酚的含量，單位為微克每毫升(μg/mL)；
V：試樣溶液定容體積，單位為毫升(mL)；
m：試樣質量，單位為克(g)。
二、結果與分析
1、不確定結果的來源與分析
從數學模型和分析過程影響因素可知，試樣中4-己基間苯二酚測定結果的不確定度的主要來源於待測物濃度(C)、試樣稱量(m)、試樣定容(V)、測量重複性、方法的回收率。
2、不確定度分量的評定
（1）待測物濃度(C)引入的不確定度
C的不確定度由標準係列溶液的配製和曲線擬合兩部分組成。標準係列溶液配製又分為儲備液的配製、以及標準曲線溶液的配製兩個過程。
①儲備液配製過程產生的不確定度u(c一1)。
標準品純度引入的不確定度：4-己基間苯二酚標準樣品的純度為≥97％，為B類評定，不確定度為a/k。依據經驗為等概率地落在區間內，即均勻分布。
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